小新今年5岁了，不要以为他是那种懵懂无知的小孩，他其实人小鬼大，喜欢漂亮的姐姐，收养了一条棉花糖一样的流浪狗——小白，还经常讲些无厘头的黄色笑话。小新的妈妈美伢是一个全职主妇，粗心而又有点神经质的她经常被小新捉弄得七窍生烟，爸爸野原亦经常被这两母子搞得晕头转向。 《蜡笔小新》的作者以一个5岁小童的眼光，40岁的成年人的心态去观察这个大千世界，看到了许多光怪陆离的景象，小新一家的幽默故事亦由此产生。
故事发生在昭和初年，一群打扮神秘举止怪异的人在夜幕的笼罩下来到了帝都东京府，他们是世世代代都在追踪和狩猎吸血鬼的吸血鬼猎人。 尤里（上村佑翔 配音）虽然身处吸血鬼猎人的阵营之内，却是非常特殊的存在，因为他的体内流淌着人类和狼人的两种血液，因此拥有着比普通人类更为强健的体魄。威拉德（堀内贤雄 配音）拥有着丰厚的学识，是军师和领袖般的存在。多萝西娅（森奈奈子 配音）外表火辣，却拥有着截然相反的冷静头脑，无论怎样紧要的危机时刻都能做出正确的判断。菲利普（小林裕介 配音）年纪虽小，却拥有着极为复杂的过去。
